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Reconocimiento
de prótidos
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MATERIALES
- Tubos de ensayo
- Gradilla
- Mechero
- Vasos de precipitados
- Pipetas
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- Solución de HCl concentrado
- Alcohol etílico
- Solución de SO4Cu al 1%
- NaOH al 20%
- Clara de huevo o leche
- Solución de albúmina
al1-2%
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1. COAGULACIÓN DE
LAS PROTEÍNAS
FUNDAMENTO
Las proteínas debido al gran tamaño de sus moléculas
forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar
formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas
superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas,
ácidos, alcohol, etc.
La coagulación de las proteínas es un proceso
irreversible y se debe a su desnaturalización por los
agentes indicados que al actuar sobre la proteína la
desordenan por destrucción de sus estructuras secundaria
y terciaria.
TÉCNICA
- Colocar en tres tubos de ensayo una pequeña
cantidad de clara de huevo (puede diluirse en un poco de agua
para obtener una mezcla espesa) o 2-3ml de leche.
- Calentar uno de los tubos al baño
María, añadir a otro 2-3ml de HCl concentrado
y al tercero 2 o 3ml de alcohol etílico.
- Observar los resultados.
2. REACCIONES COLOREADAS ESPECÍFICAS
(BIURET)
FUNDAMENTO
Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas,
que sirven por tanto para su identificación, destaca
la reacción del Biuret. Esta reacción la producen
los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos
ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH
que se destruye al liberarse los aminoácidos.
El reactivo del Biuret lleva sulfato de Cobre(II) y sosa, y
el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los
enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta
(Biuret) cuya intensidad de color depende de la concentración
de proteínas.
TÉCNICA
- Colocar en un tubo de ensayo 3ml de solución
de albúmina al 1-2%.
- Añadir 4-5 gotas de solución
de SO4Cu al 1%.
- Añadir 3ml de solución de
NaOH al 20%.
- Agitar para que se mezcle bien.
- Observar los resultados.
CUESTIONES
- ¿Cómo se manifiesta la desnaturalización
de la clara de huevo?
- ¿Cuál de los tres agentes utilizados
tiene mayor poder de desnaturalización?
- ¿Cómo podríamos saber
que una sustancia desconocida es una proteína?
- ¿Qué coloración da la
reacción del Biuret?
- ¿Una proteína coagulada podría
dar la reacción del Biuret?
- Si se realiza la reacción del Biuret
sobre un aminoácido como la Glicina ¿es positiva
o negativa? ¿Por qué?
Práctica en formato Word 2003: protidos.zip
(39Kb)
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