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Observación
de bacterias
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| OBJETIVOS |
- Realizar una tinción simple de bacterias
procedentes de distintas muestras naturales.
- Realizar dos tipos de fijaciones bacterianas y
saber en qué casos se recomienda una u otra.
- Observar la morfología bacteriana y aprender
a distinguir los distintos tipos de agrupaciones que
existen.
- Practicar con el microscopio al máximo aumento
y con el correcto empleo del aceite de inmersión.
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| MATERIAL |
- Mechero Bunsen o de alcohol
- Asa de siembra o aguja enmangada
- Pinzas
- Portaobjetos
- Muestras bacterianas de origen natural: yogur,
vinagre, sarro dental, suelo, etc.
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- Colorantes para tinción:
a) Solución de cristal violeta al 1%
b) Solución de safranina al 0,5%
c) Azul de metileno al 1%
- Microscopio y aceite de inmersión
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BACTERIAS DEL YOGUR
El yogur es un producto lácteo producido por la fermentación
natural de la leche. A escala industrial se realiza la fermentación
añadiendo a la leche dosis del 3-4% de una asociación
de dos cepas bacterianas: el Streptococcus termophilus,
poco productor de ácido, pero muy aromático, y
el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta
preparación se podrán, por tanto, observar dos
morfologías bacterianas distintas (cocos y bacilos) y
un tipo de agrupación (estreptococos, cocos en cadenas
arrosariadas). Además, el tamaño del lactobacilo
(unos 30µm de longitud) facilita la observación
aunque no se tenga mucha práctica con el enfoque del
microscopio.
- Realizar el frotis disolviendo una mínima porción
de yogur en una pequeña gota de agua.
- Fijar con metanol para eliminar parte de la grasa.
- Teñir con un colorante cualquiera de los arriba
indicados durante 1-2 minutos.
- Observar al máximo aumento del microscopio.
BACTERIAS DEL VINAGRE
El vinagre es una solución acuosa rica en ácido
acético resultante de la fermentación espontánea
del vino o de bebidas alcohólicas de baja graduación.
La acetificación del vino es producida por bacterias
aeróbicas del ácido acético, principalmente
Acetobacter aceti, aunque también Gluconobacter.
Se trata de bacilos rectos con flagelos polares.
- Tomar con una aguja enmangada una pequeña porción
de madre de vinagre natural o de la telilla que se forma
sobre la superficie de los vinos agriado.
- Extender la muestra en el portaobjetos con una gota de
agua y hacer el frotis.
- Dejar secar y fijar con calor.
- Teñir 2-3 minutos, lavar el exceso de colorante
y secar.
BACTERIAS DEL SARRO DENTAL
El sarro dental es un depósito consistente y adherente
localizado sobre el esmalte de los dientes. Está constituido
principalmente por restos proteicos, sales minerales y bacterias
junto con sus productos metabólicos. La flora bacteriana
de la cavidad bucal es muy variable dependiendo de las condiciones
que se den en el momento de hacer la preparación, pero
suelen abundar bacterias saprófitas, pudiéndose
observar gran variedad de morfologías: espiroquetas,
cocobacilos, diplococos y bacilos.
- Con una aguja enmangada tomar una pequeña porción
de sarro dental y disolverla en una gota de agua sobre el
portaobjetos.
- Dejar secar y fijar con calor.
- Teñir 2-3 minutos, lavar el exceso de colorante
y secar.
BACTERIAS DEL SUELO
La variedad de bacterias que pueden aparecer en una muestra
de suelo es prácticamente infinita, muchas de ellas no
cultivables en los laboratorios y algunas, incluso, desconocidas
para los microbiólogos. Para recoger la muestra y hacer
el frotis basta con dejar parcialmente enterrado en vertical
un portaobjetos en la tierra de una maceta o de un jardín.
Después de varios días, las bacterias se habrán
adherido al vidrio y sólo habrá que fijarlas por
calor y teñirlas con un colorante cualquiera. Previamente
hay que limpiar los bordes del portaobjetos, así como
la parte que no se va a teñir.
Foto de distintos tipos de morfología bacteriana (x1500)
Práctica en formato Word 2003: obsbacterias.zip
(33Kb)
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